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| Vibrio test; Axillary to Sylvio's Utah Zuchter thread | |
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| Topic Started: Feb 11 2009, 08:43:20 AM (253 Views) | |
| Post #11 Feb 13 2009, 05:50:32 PM | Amie |
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Huh? I wonder if Sylvio is reading this thread? |
stormy, stormy nights
  ![]](http://z4.ifrm.com/static/1/pip_r.png)
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http://www.spawar.navy.mil/sandiego/technology/mammals/interns.html Tell them Adam sent you. | |
 
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| Post #12 Feb 13 2009, 06:31:08 PM | Clint |
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No growth on TCBS media. After I was all done one of the people in the labs said it way not be as conclusive as I had hoped, some Vibrios may not grow on TCBS. Sorry I should clarify, selective media has properties that favor select groups of organisms. If the right media is used and growth occurs organisms of that group are present, no growth means no organisms of interest. |
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| Midvale (435) 213-6215 | |
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| Post #13 Feb 13 2009, 08:24:30 PM | jpiotrowski |
| Did you filter the water? I have some 0.45 micron filters that you can use. This will in essence filter out all bugs in the water. You then place the filter on the media of choice. Nutrients seep through the media and organisms grow. If I have enough, you could use two and plate on different media. |
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| Post #14 Feb 14 2009, 11:59:57 AM | Clint |
| jpiotrowski, I sterilized the water that I used to hatch, I'm not visualizing what you are talking about. Can you break it down for me a bit more? |
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| Midvale (435) 213-6215 | |
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| Post #15 Feb 15 2009, 01:22:09 AM | Sylvio |
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sorry hab aber gerade viel zu tun. Vieleicht kann ja Tina mal übersetzen das ich schneller dahinter komme was das Anliegen ist. Danke MfG Sylvio |
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| Post #16 Feb 15 2009, 08:44:14 AM | Lady Baboon |
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OK, ich versuchs mal zusammenzufassen. Clint will 2 Sorten von Artemia (San Francisco und Great Salt Lake) auf Vibrio Bakterien testen. Er will normal ausgeschluepfte Zysten von beiden Arten plattieren. Sein Salzwasser ist auf 1,023sg gemischt und er laesst es fuer eine Woche ruhen und fuellt es dann in Einweckglaeser. Die Glaeser werden dann unter Druck (15psi) fuer eine Stunde gekocht. Nach dem das Wasser abgekuehlt ist, werden zu den Glaesern Zysten von beiden Arten hinzugefuegt. (Zysten werden nicht gemischt, jede Zystenart ist in einem seperaten Glas). Danach werden die Zysten entkapselt nach der Methode, die in Wilkerson's Clownfischbuch angegeben ist. Die Methode wurde etwas abgewandelt, weil es eine sterile Technik sein soll. Es wurde kein Chlor benutzt. Die Zysten wurden in sterilen Salzwasser ausgespuelt und dann wurden ein paar Zysten zu 300ml Sterilem Salzwasser dazu getan. Ich werde mein steriles Salzwasser auch plattiern, um sicher zu gehen, dass es auch steril ist. Leider ist Zeitdruck im Labor vorhanden, um die Proben zu plattieren und wachsen zu lassen. Es koennten sich ein paar Probleme ergeben, da die Luftzufuhr zu den entkapselten Zysten nicht steril war. Ausserdem mussten die Flaschen mit den normalen schwimmenden Zysten umgestellt werden und die Zysten haben sich am Boden abgesetzt. Hoffentlich schluepfen genug fuer den Test. Danach folgen ein paar Vorschlaege, wie das Problem mit der nicht sterilen Luftzufuhr geloest werden koennte. Als Medium wird TCBS benutzt. Offensichtlich wurden keine Bakterien gefunden. Die Leute im Labor sagten, dass manche Vibrios nicht in TCBS wachsen. Spezielle Medien haben spezielle Eigenschaften/Bestandteile, die auf bestimmte Organismen aufgebaut sind. Das richtige Medium bringt bestimmte Organismen zum wachsen. Wenn nichts waechst, waren die gesuchten Organismen nicht vorhanden. Das wars in Kurzform. Hoffe, dass ich nichts Wichtiges vergessen habe. |
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| Tina | |
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| Post #17 Feb 17 2009, 08:15:50 AM | jpiotrowski |
| Sure. It is the same way I test water to make sure it doesn't contain any microbes. The problem with water samples is that you can't just take 1 ml of water and plate it for accurate results due to dilution. This is why federal regs? state that at least 100ml of water are filtered through a 0.45 micron filter, which will capture any bacteria. This filter is then layed on a TSA plate and if there are any microbes voila! I would guess you will be running into the same problems here. You will need to filter 100 mls or so onto a filter then plate, then add the filter to the plate. An alternative to this is to add 100mls of water to 1L of media. |
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| Post #18 Mar 6 2009, 10:56:11 PM | Sylvio |
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Hi Gibt es schon Neuigkeiten? MfG Sylvio |
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| Post #19 Mar 7 2009, 06:29:50 AM | Lady Baboon |
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Leider nein. Der einzige Kommentar war, dass es nicht ausreicht, 1ml Wasser zu nehmen und dann unter dem Mikroskop anzusehen. Bedingt durch den Verduennungsfaktor. Richtiger ist es, 100ml durch ein 0,45 micron Sieb zu filtern. Was du daraus erhaelt, kannst du auf einen TSA Teller legen und dir dann ansehen. Das zeigt dir dann die vorhandenen Bakterien. |
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| Tina | |
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| Post #20 May 8 2009, 09:32:38 AM | jpiotrowski |
| Whatever happened to this project? I no longer have access to an autoclave or medias, but I did bring home some filter cups. |
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